封閉用馬血清的定義、處理工藝和作用機制
封閉用馬血清是從健康馬血液中分離、經嚴格工藝處理（滅活、除菌、去雜蛋白）制成的生物試劑，核心用途是在免疫檢測實驗中阻斷非特異性結合，減少背景干擾，提高實驗結果的特異性與準確性。其本質是不含目標抗體/抗原的天然蛋白混合物，通過占據實驗載體（如硝酸纖維素膜、酶標板、組織切片）上的空白位點，避免檢測抗體/抗原與載體非特異性結合，從而凸顯特異性信號。
核心處理工藝與質量標準：
滅活處理：56℃水浴30分鐘，破壞血清中的補體系統（避免補體參與免疫反應干擾結果）；
除菌純化：經0.22μm濾膜過濾，去除細菌、真菌等微生物，確保無菌性；
去雜處理：部分產品會去除高豐度雜蛋白（如白蛋白聚合物），降低非特異性結合風險；
質量指標：蛋白濃度（通常5-10mg/mL）、無菌性、無支原體、內毒素含量低（＜10EU/mL）、無目標抗原/抗體交叉反應。
2.封閉用馬血清的核心作用機制
免疫檢測實驗中（如WesternBlot、ELISA），載體表面（如酶標板）除了固定的目標抗原外，還存在大量空白位點。若不進行封閉，檢測抗體（一抗/二抗）可能通過疏水作用、靜電作用與這些空白位點結合，導致“假陽性”或高背景信號（如膜上出現非特異性條帶、酶標板OD值偏高）。
封閉用馬血清的作用機制：
占據空白位點：血清中的白蛋白、球蛋白等天然蛋白，通過非特異性結合覆蓋載體表面的空白區域，形成“屏障”；
不干擾特異性結合：馬血清中不含實驗目標的抗原/抗體，不會與檢測抗體、目標抗原發生特異性反應；
降低背景噪音：阻斷檢測抗體與載體的非特異性結合，使實驗結果的“信號-背景比”顯著提升，讓特異性條帶/信號更清晰。
更新時間：2025-12-12
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